【摘要】一種用于下井儀的多芯滑環(huán)連接裝置,包括四芯滑環(huán)插頭(2)、鋼絲鎖圈(3)、四芯滑環(huán)插座(4)等,四芯滑環(huán)插頭(2)安裝在儀器上接頭(1)上,四芯滑環(huán)插座(4)安裝在儀器下接頭(6)上,四芯滑環(huán)插座(4)通過鋼絲鎖圈(3)分別儀器上接
【摘要】 本發(fā)明公開了一種免疫磁珠分選去除分化體系中胚胎干細胞的方法,屬于醫(yī)學(xué)生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明包括如下步驟:(1)制備單細胞懸液;(2)MACS分離純化分化細胞:按1∶100的稀釋比例加入小鼠抗小鼠SSEA-1 IgM抗體,使總體積為500μl,4℃孵育10min;用2ml MACS緩沖液洗滌細胞兩次離心,去除多余的抗體;用80μl MACS緩沖液重懸細胞,加入包被羊抗小鼠IgM抗體的免疫磁珠20μl,4℃放置15min;加入MACS緩沖液洗滌離心,棄上清,重新用500μl緩沖液重懸細胞;2ml緩沖液預(yù)洗LD柱后,將500μl細胞懸液過柱;1ml緩沖液洗柱兩次,去除非標(biāo)記陰性細胞;移柱出磁場,用緩沖液洗柱,收集洗液即為陽性細胞。本發(fā)明的優(yōu)點是:操作簡便快速,無須昂貴的實驗設(shè)備,純度較高,分篩后的細胞存活率高。 【專利類型】發(fā)明申請 【申請人】首都醫(yī)科大學(xué)宣武醫(yī)院 【申請人類型】機關(guān)團體 【申請人地址】100053北京市宣武區(qū)長椿街45號 【申請人地區(qū)】中國 【申請人城市】北京市 【申請人區(qū)縣】西城區(qū) 【申請?zhí)枴緾N200610113612.7 【申請日】2006-10-09 【申請年份】2006 【公開公告號】CN1932008A 【公開公告日】2007-03-21 【公開公告年份】2007 【授權(quán)公告號】CN100587063C 【授權(quán)公告日】2010-02-03 【授權(quán)公告年份】2010.0 【發(fā)明人】關(guān)云謙; 朱宛宛; 任萍; 王淑艷; 徐艷玲; 張愚 【主權(quán)項內(nèi)容】1.免疫磁珠分選胚胎干細胞分化細胞中原始細胞的方法,其特征在于包括如下步 驟: (1)制備單細胞懸液:取培養(yǎng)的胚胎干細胞分化期細胞,用0.25%Trypsin-EDTA 消化2-4min,加血清終止消化,打散后離心,棄上清;用MACS緩沖液重懸細胞,過 40μm濾網(wǎng)獲得單細胞懸液,調(diào)整細胞密度至107/ml; (2)MACS分離純化分化細胞:按1∶100的稀釋比例加入小鼠抗小鼠SSEA-1IgM 抗體,使總體積為500μl,4℃孵育10min;用2ml?MACS緩沖液洗滌細胞兩次離心,去 除多余的抗體;用80μl?MACS緩沖液重懸細胞,加入包被羊抗小鼠IgM抗體的免疫磁 珠20μl,4℃放置15min;加入MACS緩沖液洗滌離心,棄上清,重新用500μl緩沖液 重懸細胞;2ml緩沖液預(yù)洗LD柱后,將500μl細胞懸液過柱;1ml?MACS緩沖液洗柱兩次, 去除非標(biāo)記陰性細胞;移柱出磁場,用緩沖液洗柱,收集洗液即為陽性細胞。 【當(dāng)前權(quán)利人】首都醫(yī)科大學(xué)宣武醫(yī)院 【當(dāng)前專利權(quán)人地址】北京市宣武區(qū)長椿街45號 【統(tǒng)一社會信用代碼】121100004006883851 【被引證次數(shù)】2 【被他引次數(shù)】2.0 【家族被引證次數(shù)】2
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