【摘要】本發(fā)明公開了一種新型多片式整體板簧,包括多 片重疊在一起的長度不同的板片,相鄰的板片中長度較短的板 片至少在其靠近兩端的部分與長度較長的板片通過緊固構(gòu)造 相互結(jié)合,使其不能發(fā)生相對位移。這種新型多片式整體板簧 可提高整個(gè)板簧的承載能
【摘要】 制作青霉素G檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法及青霉素G 酶聯(lián)免疫快速檢測方法,它涉及一種制作青霉素G檢測標(biāo)準(zhǔn)曲 線的方法及青霉素G檢測方法。它解決了目前青霉素G檢測 法檢測時(shí)間長的問題。繪標(biāo)準(zhǔn)曲線:蛋白與青霉素G偶聯(lián)后注 射入小鼠體內(nèi)制備抗體,再用免疫反應(yīng)棋盤法選擇抗原抗體反 應(yīng)的工作濃度,然后挑選OD450 值為1~1.5的孔計(jì)算、繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。檢測步驟:(一)抗體按 工作濃度稀釋后封閉,然后按繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線過程中抗原稀釋液 與抗體稀釋液的體積比加入經(jīng)梯度稀釋的樣品,再在41℃條件 下酶聯(lián)反應(yīng)1~1.5h并用TMB顯色;(二)測量 OD450值,選OD值為0.4~1.5 的樣品稀釋液;(三)查曲線中對應(yīng)數(shù)值再乘以樣品稀釋倍數(shù), 即得出樣品青霉素G殘留量。本發(fā)明檢測時(shí)間短為1~1.5h, 比傳統(tǒng)酶聯(lián)免疫法快2~3h。 【專利類型】發(fā)明申請 【申請人】中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測技術(shù)研究所 【申請人類型】科研單位 【申請人地址】100081北京市海淀區(qū)中關(guān)村南大街12號 【申請人地區(qū)】中國 【申請人城市】北京市 【申請人區(qū)縣】海淀區(qū) 【申請?zhí)枴緾N200610010568.7 【申請日】2006-09-18 【申請年份】2006 【公開公告號】CN1928558A 【公開公告日】2007-03-14 【公開公告年份】2007 【發(fā)明人】王靜; 曹維強(qiáng); 丁志剛; 金芬; 邵華; 楊錨 【主權(quán)項(xiàng)內(nèi)容】1、制作青霉素G檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法,其特征在于制作青霉素G檢測標(biāo) 準(zhǔn)曲線的方法如下:(1)取0.17g青霉素G分別與0.12g牛血清白蛋白和0.12g 卵清白蛋白溶解于20mL、pH值為6.8的磷酸鹽緩沖液,再分別加入濃度為2.5% 的戊二醛10mL,攪拌28~32h;(2)在pH值為7.0的磷酸鹽緩沖液中透析6~8h, 微孔膜收集抗原青霉素G蛋白偶聯(lián)物;(3)取2mL青霉素G牛血清白蛋白偶 聯(lián)物與8mL完全福氏佐劑或8mL不完全福氏佐劑乳化,每只鼠腹腔內(nèi)注射乳 化抗原0.2mL,加強(qiáng)免疫注射青霉素G,直到抗體效價(jià)為1∶16以上;(4)分 離血清;(5)采用硫酸銨鹽析法分離血清中的抗體,再以DEAE-離子交換劑 法純化抗體;(6)梯度稀釋抗體,并用濃度為1%的酪蛋白-PBS溶液封閉; (7)梯度稀釋抗原青霉素G.卵清白蛋白偶聯(lián)物;(8)采用免疫反應(yīng)棋盤法選 擇抗原抗體反應(yīng)的工作濃度:按棋盤法將梯度稀釋的抗原青霉素G卵清白蛋 白偶聯(lián)物加入梯度稀釋的抗體中酶聯(lián),反應(yīng)完全后用TMB顯色;(9)用酶標(biāo) 儀在紫外光λ=450nm下測量OD值,挑選OD450值為1~1.5的孔,以所選孔中 抗體的稀釋倍數(shù)作為工作濃度,并通過抗原稀釋的倍數(shù)計(jì)算、繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線。 【當(dāng)前權(quán)利人】中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測技術(shù)研究所 【當(dāng)前專利權(quán)人地址】北京市海淀區(qū)中關(guān)村南大街12號
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